文 | 药疯
每年的ASCO大会，都会得到肿瘤领域相关研究人员的重点关注。哪些靶点显示成药潜力？哪些候选药物获得积极数据？哪些癌种得到有效控制？所有的一切都在触动着肿瘤药物研究人员和投资商的敏感神经。尤其是那些持续亮相大会的潜力品种、优势品种，受关注度自然更高。靶点RAD51，凭借其所具备的研发潜力和相应品种的初战告捷，连续多年亮相ASCO大会，基于对该靶点的持续跟踪，总结前期研究+当前进展的基础上，汇总信息，以形成对一个靶点研究进展的总体概况。
01
RAD51/靶点背景介绍
RAD51基因，定位于第15号染色体，含有9个外显子和8个内含子，编码一条由339个氨基酸组成的多肽；RAD51首次被报道的时间为1993年，由ogawaH等人克隆，是真核生物体内的一种DNA重组酶。
图1.1 RAD51存在的两种二聚体形态
RAD51同系物有XRCC2、XRCC3、RAD51B（RAD51L1）、RAD51C（RAD51L2）和RAD51D（RAD51L3），这些同系物与RAD51有20%～30%的氨基酸序列相似度，且与RAD51共同参与HR修复过程。
图1.2 人类RAD51类似物组成的复合物
DSBs发生时，断裂末端处在MRE11/RAD50/NBS1(MRN)三元复合物中的MRE11的作用下，沿着5'向3'方向切割，暴露了与复制蛋白A(RPA)分子结合的3'单链DNA末端。RAD51竞争性置换RPA并与单链DNA的3'末端上结合，形成连续的RAD51-单链DNA复合物；后RAD51识别同源DNA模板，催化DNA链的配对、延伸；最后在核酸酶和连接酶的作用下，形成完整的双链DNA分子。
图1.3 RAD51催化的同源重组修复
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全球在研药物品种汇总
针对于RAD51这个靶点，全球进展最快的品种为Cyteir公司开发的抑制剂CYT-0851，该品种为口服药物，旨在通过抑制RAD51介导的HR修复；此外，Cyteir还布局了后续品种CYT-1853，但据官网介绍，尚未进入临床。PS：CYT-0851尚未进入中国进行临床。
图2.1 CYT-0851重要临床相关内容
此外，早期文献报道的品种还有Halenaquinone、B02、RI-1、IBR2等，但由于毒性大等副作用问题，均为进入到临床阶段。
另，在RAD51领域进行研发投入的公司主要还有SATYA Pharma Innovations（品种代号SAT-电脑93和SAT-13），而国内布局RAD51的公司主要为先声药业（品种代号SCR-6992）。据先声药业官网介绍：先声药业自主研发的临床前候选分子SCR-6992作为新一代RAD51抑制剂，在体外对人淋巴瘤Daudi细胞具有显着的特异性抗增殖能力(IC50=12 nM)，与化疗药物或DDR靶向药物联合应用时，在淋巴瘤和实体瘤细胞系中产生协同抗癌反应。动物实验证实，SCR-6992显著抑制恶性淋巴瘤肿瘤Daudi的肿瘤生长，当以80mg/kg/天口服给药时观察到肿瘤消退。SCR-6992还在啮齿动物和犬类动物模型中显示良好的药代动力学特征。在14天剂量耐受研究中，当剂量分别高达200 mg/kg和40 mg/kg时，无明显的血液学或胃肠道毒性。
03
2022 ASCO关于CYT-0851的报道
对于RAD51的报道，还是要关注重点品种CYT-0851的动向；令人欣慰的是，继2021年亮相ASCO后，本年度该品种继续亮相ASCO，仅凭此即可以看到很多积极内容。
图3.1 2021-2022/CYT-0851连续2年登陆ASCO
（图片源：https://conferences.asco.org/am/attend）
2022年，关于CYT-0851的题目为“Phase 1 results of a phase 1/2 trial of 电脑 CYT-0851, a first-in-class inhibitor of RAD51-mediated homologous recombination, in patients with advanced solid and hematologic cancers”，临床试验资料为NCT03997968，具体内容如下：
按照3+3设计，晚期血液肿瘤和实体肿瘤患者接受连续28天/周期的剂量递增的CYT-0851治疗；主要目标是确定最大耐受剂量；次要目标包括安全性、药代动力学特征和抗肿瘤活性。
结果：截至2021年11月15日，73名晚期癌症患者（非霍奇金淋巴瘤 n = 18；肉瘤 n = 16；胰腺癌 n = 11；乳腺癌 n = 8；头颈部鳞状细胞癌 n = 6；卵巢癌 n = 4；小细胞肺癌 n = 4；其他 n = 4；骨髓瘤 n = 2）在12个队列中接受治疗（每日总剂量：30 mg 至1200 mg）。一名患者在1200 mg时出现可逆性代谢性酸中毒的剂量限制性毒性(DLT)。3名患者中有2名（给药800mg），在第二周期治疗中出现了可逆的DLT样事件~Gr3干性皮肤、Gr3肌痛和多发性关节炎。10名患者中有3名（给药600mg），在第一周期中出现了DLT事件~1名患者出现Gr3厌食症、Gr3口腔炎、呕吐和脱水的SAE，2名患者出现Gr3疲劳。每天给药400 mg无DLT发生，设定为RP2D。进一步统计，42名患者(57.5%)发生了CYT-0851相关的不良反应，其中12名(16.4%)发生了Gr3/4 AE。无与治疗相关死亡事件发生。2名患者（2.7%，给药600mg/800mg）因AE退出试验。最常见因CYT-0851相关AE主要是包括疲劳(20.5%)、高尿酸血症(11%)、恶心(11%)、脱发(9.6%)、便秘(8.2%)和头痛(8.2%)。CYT-0851，半衰期为3天。每天400 mg的暴露量与临床前模型中的趋势一致，呈剂量相关。
综上，研究者认为，CYT-0851在I期晚期癌症患者群体中显示出确切且具有广泛的临床疗效。安全性数据是具有正向指导意义的，AE可逆。六个扩展队列（DLBCL、滤泡性淋巴瘤、骨髓瘤、胰腺癌、卵巢癌和肉瘤）正在进行注册以推进RP2D。该品种与其他化疗药的临床I期试验也在进行当中。PS：由上可推断化疗药物为吉西他滨、卡培他滨、苯达莫司汀，等。
图3.2 NCT03997968主要临床目标
（图片源：https://clinicaltrials.gov/ct2/home）
04
其他RAD51亮相2022 ASCO的报告
除上述RAD51重点药物CYT-0851外，RAD51这个靶点还多次出现在其他报告当中，由此足见该靶点的重要程度和热度；相关报告具体如下表所示。
表4.1
2022 ASCO年会-RAD51内容相关报告列表
序号 | 报 告 名 称 |
1 | Comprehensive whole-exome and transcriptome profiling to identify actionable alterations associated with response to PARP inhibitors in breast cancer. |
2 | DOLAF: An international multicenter phase II trial of durvalumab (MEDI4736) plus olaparib plus fulvestrant in patients with metastatic or locally advanced ER-positive, HER2-negative breast cancer selected using criteria that predict sensitivity to olaparib. |
3 | Detection of homologous recombination deficiency (HRD) in cell-free DNA (cfDNA) using an amplicon-based next-generation sequencing (NGS) assay. |
4 | Circulating tumor DNA (ctDNA) determinants of improved outcomes in patients (pts) with advanced solid tumors receiving the ataxia telangiectasia and Rad3-related inhibitor (ATRi), RP-3500, in the phase 1/2a TRESR trial (NCT04497116). |
5 | Adaptive response analysis of colorectal cancer cells to low-dose oxaliplatin as a tool to deciphering mechanisms of synergistic drug interaction. |
6 | Identification of homologous recombination deficiency (HRD) by RAD51 in a tumor molecular profiling program for precision medicine. |
7 | The impact of HRD in patients with pancreatic adenocarcinoma undergoing surgical resection: An updated analysis. |
8 | Potential indicators in circulating cell-free DNA for monitoring PARP inhibitor resistance in high-grade serous ovarian cancer. |
9 | Efficacy of maintenance olaparib plus bevacizumab in patients with newly diagnosed advanced ovarian cancer according to BRCA mutation genotype in the phase III PAOLA-1/ENGOT-ov25 trial. |
10 | Landscape of homologous recombination reversion mutations in gynecologic malignancies. |
11 | Impact of cancer susceptibility gene (CSG) mutations in advanced NSCLC (aNSCLC). |
12 | Rates of pathogenic variants in common cancer genes among different racial/ ethnic groups. |
13 | Ancestry-specific risk of triple-negative breast cancer (TNBC) associated with germline pathogenic variants (PV) in hereditary cancer (CA) predisposition genes. |
14 | Heart toxicity effects (HTE) of anthracyclines-containing regimens (ACRs) in patients with breast cancer (BC) carrying mutational signature of homologous recombination deficiency (HRD). |
15 | Retrospective analysis of non-BRCA gene pathogenicity variation in Chinese patients with ovarian cancer. |
16 | Genetic epidemiology of breast cancer (BC) risk genes from a diverse realworld oncology practice in Brazil. |
17 | Correlative results from NCI protocol 10250: A phase II study of temozolomide and olaparib for the treatment of advanced uterine leiomyosarcoma. |
通过研究表格中的信息及具体的报告内容，总结如下：从癌种来说，与RAD51相关领域主要集中于肿瘤中的乳腺癌（包括TNBC）、结直肠癌、胰腺癌、卵巢癌，等；基因主要相关BRCA突变基因，等；药物主要相关PARP抑制剂（如奥拉帕利）、ATR抑制剂、化疗药物（如奥沙利铂），等。报告中相关于RAD51的靶点内容，主要是体现在肿瘤发生时RAD51相关的融合和高表达。且其出现频次和地位几乎等同于合成致死及相关重点靶标如ATM、ATR、CHEK1、CHEK2、WEE1等，属于癌症易感基因。
05
2022年国内在RAD51方面的文献研究
通过对国内的文献进行搜索，对于RAD51这个靶点，也有一些研究进展，尤其是与靶点相关，以及肿瘤转移和耐药。
? RAD51促进恶性肿瘤转移和耐药
RAD51在恶性肿瘤中的高表达已经得到了广泛证实，癌症基因组图谱（TCGA）数据库显示，在926个病例中占比较高的肿瘤类别包括卵巢癌、乳腺癌和支气管或肺癌。有研究表明，通过生物信息学分析证明卵巢癌中RAD51表达高于正常卵巢，且这种高表达与癌症的DNA损伤修复增强、对多类化学药物的耐药性和较短的总生存期（OS）显著相关，证实了RAD51可以作为卵巢癌相关的生物标志物。还有研究发现，顺铂可以增强RAD51的表达，其高表达会导致小鼠对顺铂的耐药；而二甲双胍通过降低RAD51蛋白稳定性并增加其泛素化调节RAD51的表达，逆转肿瘤耐药。
? 与PARP、BRCA相关的研究
PARP抑制剂，凭借合成致死概念的验证成功，成为了合成致死方向的领头羊，并成功开发了一系列上市药物。PARP抑制剂对于具有乳腺癌易感(BRCA)基因缺陷的卵巢癌患者有很好的治疗效果。随着研究的深入，人们发现PARP抑制剂对于很多没有BRCA基因缺陷的患者也非常有效。BRCA1和BRCA2是经典的抑癌基因，在DNA双链断裂同源重组修复中起举足轻重的作用。有研究显示，BRCA2和RAD51基因突变可以促进卵巢癌的发生发展。且证实BRCA1、BRCA2、RAD51和FANCD2蛋白在多种癌症中过表达，而且这些蛋白的过表达有可能是患者不良预后的指标。
06
结论
综上，即为RAD51的在研概况。进一步总结如下：1）靶点机制清晰，活性特点正在逐渐被证实；2）药物开发进展相对积极；3）跟进企业不多，赛道尚不拥挤；4）合成致死领域，未来可期。
参考资料（往下滑动查看更多）：
1.2021年度ASCO值得深入关注的在研靶标. 新浪医药
2.Crystal structure of a Rad51 filament. nature structural&molecularbiology.
3.Felix Blanc-Durand et. Al EFFORT: Evaluation of a RAD51 functional assay in advanced ovarian cancer, a GINECO/GINEGEPS study.2021 ASCO, abs 5513.
4.RAD51 paralog function in replicative DNA damage and tolerance. https://doi.org/10.1016/j.gde.2021.06.010
5.https://conferences.asco.org/am/attend
6.https://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03997968?term=cyteir&draw=2&rank=1
7.RAD51在恶性肿瘤转移和耐药中的作用及研究进展.CNKI
8.BRCA1、BRCA2、RAD51和FANCD2在上皮性卵巢癌中的表达及其与临床病理特征的关系.CNKI
9.http://www.simcere.com/news/detail.aspx?mtt=216
10.2022-ASCO-Annual-Meeting-Abstract
电脑
